Κατά την περίοδο των δυναστειών Wei, Jin, Southern και Northern, ο Δρόμος του Μεταξιού αναπτύχθηκε συνεχώς, συμπεριλαμβανομένου του Βορειοδυτικού Δρόμου του Μεταξιού (που ονομάζεται επίσης Δρόμος του Μεταξιού της Όασης ή Δρόμος του Μεταξιού της Ερήμου), του Νοτιοδυτικού Δρόμου του Μεταξιού και του Θαλάσσιου Δρόμου του Μεταξιού. Χαρακτηρίστηκε από τη μεταβατική περίοδο από τη δυναστεία Han στις δυναστείες Sui και Tang, την περαιτέρω ανάπτυξη του Θαλάσσιου Δρόμου του Μεταξιού και τις συχνές ανταλλαγές μεταξύ των βόρειων και νότιων καθεστώτων και των δυτικών περιοχών [27].
Το πρώτο έτος του Tai 'an (455) του αυτοκράτορα Wencheng του Βόρειου Wei, μετά από ένα μεγάλο διάλειμμα στις άμεσες επαφές, η Περσία δημιούργησε άμεση επαφή με τη δυναστεία Βόρειου Wei, η οποία ενοποίησε τη βόρεια Κίνα. Από αυτή την εποχή μέχρι το τρίτο έτος του Zhengguang (522), το Βιβλίο του Wei καταγράφει δέκα περσικές αποστολές, οι πρώτες πέντε υποτίθεται ότι πήγαν στο Pingcheng (σήμερα Datong, Shanxi), την πρωτεύουσα του Βόρειου Wei, και οι τελευταίες πέντε στο Luoyang μετά τη μεταφορά της πρωτεύουσας το 493, φέρνοντας γυάλινα χειροτεχνήματα στην Κίνα. [28]
Το πρώτο έτος της Θεϊκής Χελώνας (518), οι Song Yun και Bhikkhu Huisheng ξεκίνησαν από το Luoyang σε μια αποστολή στις Δυτικές Περιοχές κατά μήκος του Δρόμου του Μεταξιού για να λατρέψουν βουδιστικά sutras. Το τρίτο έτος του Zheng Guang (522), οι Song Yun και Huisheng επέστρεψαν στο Luoyang από την Ινδία και έφεραν πίσω 170 Mahayana Classics, τα οποία εμπλούτισαν τον βουδιστικό πολιτισμό της Κίνας.
Πέρσες απεσταλμένοι ακολούθησαν επίσης τον Δρόμο του Μεταξιού περαιτέρω στις νότιες δυναστείες. Middle Datong δύο χρόνια (530), η Περσία έστειλε έναν απεσταλμένο για να προσφέρει το λείψανο του δοντιού. Τον Αύγουστο του πέμπτου έτους (533), έστειλε έναν απεσταλμένο και πρόσφερε τα αγαθά του. Τον Απρίλιο του πρώτου έτους του Datong (535), έγινε μια άλλη προσφορά. Η διέλευση της Περσίας οδήγησε στη Νότια Δυναστεία, η οποία πήγε από τις Δυτικές Περιοχές στο Yizhou (Sichuan), και μετά κάτω από τον ποταμό Yangtze προς το Jiankang (σημερινό Nanjing).